假单胞菌的常规检测分离
发布时间：2024-07-19 浏览次数：17
假单胞菌（Pseudomonas）是潮湿环境的典型居民，在化妆品、游泳池、热水浴缸和鞋的内底中都有发现，导致毛囊炎、外耳炎和糖尿病足感染。大多数假单胞菌属需氧、过氧化氢酶阳性、氧化酶阳性、革兰氏阴性杆菌（aerobic, catalase-positive, oxidase-positive, gram-negative bacilli）。它们的代谢主要是呼吸性的，以氧为终端电子受体，很少发酵，利用精氨酸进行厌氧生长。许多假单胞菌是通过极性鞭毛运动的（polar flagella）。
如今，虽然铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）引起最大的发病率和死亡率，其他假单胞菌，虽然经常从临床标本分离，只是偶尔参与引发疾病。铜绿假单胞菌在医院环境中无处不在，几乎存在于任何有水分的地方，包括医疗设备、消毒溶液和肥皂。它很少作为健康人正常菌群的一部分被发现，但在住院患者中，定植率随着住院时间的延长而增加。铜绿假单胞菌可在烧伤、创伤和手术伤口患者中被发现，在尿路操作后，在造血系统、网状内皮系统和淋巴系统疾病患者以及细胞或体液防御受损的患者中产生严重的感染。肺部感染常见于囊性纤维化(cystic fibrosis, CF)患者或机械通气（mechanical ventilation）患者。严重白细胞减少患者的死亡率最高。铜绿假单胞菌产生粘液多糖、内毒素和蛋白质酶，这些酶使补体成分失活，从而在一定程度上抑制调节和炎症反应（opsonization and the inflammatory response），并可能有助于其侵袭性。外毒素A（Exotoxin A）促进细胞损伤和组织侵袭，并对巨噬细胞有毒性。
培养中的铜绿假单胞菌的实验室诊断常常是可疑的，因为它有葡萄状或玉米粉的气味，其菌落在羊血琼脂上的粗糙或磨玻璃外观，并且存在两种色素中的一种或两种:一种蓝绿色荧光色素或由pyoverdin色素引起的金属光泽。通过氧化酶反应阳性，在42°C下生长，在TSI琼脂中进行碱性斜/中性对接反应，以及在TSI和假单胞菌P琼脂的斜面上形成光泽或色素，可以很容易地识别出它。碳水化合物利用试验应在O-F基础培养基中进行，其中含有少量的蛋白胨和相对大量的碳水化合物，因此，它可以检测到由这组细菌形成的非常少量的酸。反应通常在48小时内完成，但也可能需要长达7天的时间。与传统鉴定方法相比，由于缩短了周转时间和降低了费用，MALDI-TOF现在通常用于铜绿假单胞菌的鉴定。应对所有具有临床意义的铜绿假单胞菌进行药敏试验。铜绿假单胞菌感染和药敏试验应常规进行以下药物:β-内酰胺联合药物如哌拉西林-他唑巴坦（piperacillin-tazobactam）、头孢他啶-阿维巴坦（ceftazidime-avibactam）和头孢甲苯-他唑巴坦（ceftolozane-tazobactam）、头孢他啶（ceftazidime）、头孢吡肟（cefepime）、氨曲南（aztreonam）、碳青霉烯类药物（carbapenems）、氨基类苷类药物（aminoglycosides）和氟喹诺酮类药物（fluoroquinolones）。铜绿假单胞菌对阿莫西林-克拉维酸盐（amoxicillin-clavulanate）、头孢曲松（ceftriaxone）、TMP-SMX和四环素（tetracyclines）以及较新的广谱抗生素厄他培南和替加环素（newer broad-spectrum antibiotics ertapenem and tigecycline）具有内在耐药性。铜绿假单胞菌的医院菌株可能对许多种类的抗生素具有耐药性，并且多重耐药铜绿假单胞菌的发病率正在增加，特别是在重症监护病房和长期患有假单胞菌感染的患者中，例如患有CF和其他慢性综合征的患者。当遇到耐药分离株时，通常对粘菌素和多粘菌素B（polymyxin B）进行额外的药敏试验。
Figure 1. Gram stain of Pseudomonas aeruginosa （Derived from McPherson, R. A., & Pincus, M. R. 2021）
参考文献：McPherson, R. A., & Pincus, M. R. (2021). Henry's clinical diagnosis and management by laboratory methods E-book. Elsevier Health Sciences.
来源：微生物安全与健康网
链接：https://www.mbiosh.com/column/testing-technology/testing-technology-method/27606
