产品名称：NGS End Repair/dA-Tailing Module
产品编号与包装规格：
| 编号 | 产品名称 | 规格 | 产品介绍 | 价格 |
| HKM055A | NGS End Repair/dA-Tailing Module | 24次/盒 | NGS末端修复 | 2325 |
产品描述：
NGS End Repair/dA-Tailing Module 为 illumina 高通量测序 平台文库构建配套模块，能够对超声处理、化学处理、酶处理 的片 段化 双 链 DNA或 小 片 段 DNA的 末 端 进行 修复 ， 使 DNA 双链形成平末端，并分别在片段化 DNA 两端添加 5'-P 和 3' 端 dA，所得产物无需纯化，直接用于 NGS Fast Ligation Module（货号：HKM066）进行 DNA 片段的 adapter 连接。本 试剂盒采用一步法反应流程，省去了多步纯化步骤，可对极低 DNA 样本进行高效、快速末端修复及 dA 尾添加，操作更加简 便，文库转化效率更高。
适用范围：用于双链 DNA 片段的末端修复及 3'端添加 dA， 适用于 illumina 高通量测序平台。
适用样本量：1ng~1µg DNA。
产品特点：
1) 操作简便，一步完成双链 DNA 片段的末端修复、dA 添加 反 应；
2) 文库转化率高，DNA 样本起始量可低至 1ng。
注意事项：
1、开始实验前，对 DNA 浓度精确定量至关重要，推荐 DNA 上样量为 1ng-1µg。DNA可溶解于去离子水、10 mM Tris Buffer EB 或 0.1×TE 等。
2、推荐 DNA 的上样量指的是片段化后的 dsDNA 的量。推荐 使用 Qubit、Picogreen 或者其他染料法对 DNA 浓度进行精确定 量。
3、请确认 DNA 溶液中不含阳离子及螯合剂，如果 DNA 溶解 于 1×TE 或不确定 DNA 溶液中的 EDTA 浓度，需先对 DNA 进行纯化后再进行片段化反应。
保存温度：所有组分-20℃保存，尽量避免反复冻融。
NGS End Repair/dA-Tailing Module 产品包装：
| 产品组成 | A 包装(24 次) | B 包装(96 次) |
| End-repair And A-tailing Enzyme Mix | 120μl | 480μl |
| End-repair And A-tailing Reaction Buffer | 100μl | 400μl |
| RNase Free Water | 1ml | 1ml×4 |
操作方法：
1，将 End-repair And A-tailing Reaction Buffer 和 End-repair And A-tailing Enzyme Mix 置于冰上融化， 轻轻颠倒混匀。
2，在 200μl 的 Nuclease-Free 管中按下表配制反应体 系，冰上操作，各组分加入后，请轻柔吸打混匀，注 意不要涡旋
| Fragmented DNA | X |
| Endrepair and A-tailling Reaction Buffer | 4μl |
| RNase Free Water Up | to 40μl |
3，向步骤 2 中的 Nuclease-Free 管中加入 5µl End-repair And A-tailing Enzyme Mix，轻柔吹打 6-8 次， 不要涡旋。
注：此过程需一直处于冰浴中进行。
4，将配置好反应体系的 Nuclease-Free 管放入 4℃预 冷的 PCR 仪中，并开启以下 PCR 程序：
| 热盖 105℃ | on |
| 20℃ | 15min |
| 72℃ | 15min |
| 4℃ | Hold |
5，当反应程序结束后，将 Nuclease-Free 管从 PCR 仪中取出并置冰上。
6，立即进入接头连接步骤，为保证连接效率，推荐 使用 NGS Fast Ligation Module（HKM066）。
